奎宁酸检测方法
检测原理
奎宁酸检测基于分光光度法原理。奎宁酸在紫外-可见光区(220-400nm)具有特征吸收峰,尤其最大吸收波长为274nm。通过测定样品溶液在特定波长下的吸光度值,结合标准曲线计算奎宁酸含量。
检测步骤
1. 试剂配制
试剂名称 | 配制方法 | 浓度 |
盐酸奎宁酸标准液 | 精确称取0.1g纯品,用0.1mol/L HCl溶解定容至100mL | 1mg/mL |
缓冲溶液 | 0.1mol/L磷酸缓冲液(pH 5.5) | - |
2. 样品处理
- 样品预处理:离心取上清液
- 稀释定容:加入缓冲溶液稀释10倍
3. 测定操作
- 空白对照:缓冲溶液+标准液
- 样品测定:标准液+样品溶液
- 分光光度计设置:波长274nm,比色皿1cm
4. 结果计算
奎宁酸含量(mg/mL)=(C×V)/(S×V0)×1000
公式说明:C为标准液浓度,V为样品体积,S为标准液吸光度,V0为稀释倍数
注意事项
- 标准品需避光保存(2-8℃)
- 分光光度计预热时间≥15分钟
- 每日检测前需进行波长验证
参考文献
《分析化学手册》(第三版)
《临床检验方法学》(2020版)